ABI Veriti 梯度PCR仪使用说明

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2024年10月12日发(作者:)

ABI Veriti 梯度PCR仪使用说明

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ABI Veriti 梯度PCR仪使用说明

基因

Gene Company Limited

(声明:此说明仅供一般操作参考,未经厂家审核也不代表任何技术承诺,请以原版资料为准)

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操作步骤:

1、 打开PCR仪的热盖,插入0.2ml的样品管。盖好热盖。

2、 打开PCR仪的电源,仪器程序开始初始化,需等待几分钟。

3、 初始化完成后,显示主菜单:

4、 点“Browse/New Methods”,进入PCR程序列表:

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5、 可以直接点一个PCR程序,选择“Start Run”运行;点右边的符号,可以选择

不同的文件夹。如要新建一个PCR程序,点“New”,出现PCR程序:

6、 添加一段程序:点中上方的“Stage”位置,该位置变红;再点“Add”,软件将加入

一段新的程序。

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7、 修改循环数、温度、时间:点中循环次数、温度或时间位置,下方出现数字键。

依次点数字键,出现合适数字后,点“Done”确定。

8、增加一个步骤:点“Step”位置,该位置变红;再点“Add”,软件将加入一个新的步

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骤。

9、删除一个步骤:点“Step”位置,在点“Delete”,软件将该步骤删除。

10、建立梯度模式:

1) 点中一个步骤,再点“Option”键,出现选项如下

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2) 点“VeriFlex step”,出现梯度创建窗口:

输入6个梯度温度,温度下方的“1-2”是指对应的1、2两行加热孔,全部输好后,

点“Done”确定。注意:相邻的两个梯度温度之差最大不能超过5℃!

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11、建立渐变模式:

1)点中一个步骤,再点“Option”键,出现选项如下

2)点“Auto Delta”,出现渐变模式创建窗口。

点“Staring Cycle”,输入起始循环数;点“Delta Temperature”,输入温度变化值;点

“Delta Time”,输入时间变化值。渐变模式适用于touchdown PCR,可以提高PCR反

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应的特异性。例:输入起始循环数为2,温度变化值为+0.5℃,时间变化值为+5s,

则表示从第2个循环开始,每循环一次升温0.5℃,时间增加5s。

12、增加暂停步骤:

1)点中一个步骤,再点“Option”键,出现选项如下

3) 点“Pause”,出现如下窗口。

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输入暂停的起始位置,暂停间隔和暂停时间,点“Done”确定。上图表示每隔10个循

环暂停10s,在10个循环的第1个循环之前暂停。

13、编辑PCR程序完成后,点“Save”保存。

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点“Run Method”,输入PCR程序名称;点,选择保存PCR程序的文件夹(如

果要保存在USB文件夹中,需要先插U盘)。再输入反应体积和热盖温度(这两项

在运行程序时可以修改)。点“SaveδExit”确定。

14、回到PCR程序列表界面,选择新建的PCR程序。

15、点“Start Run”,出现运行参数设置窗口

输入反应体积和热盖温度,点“Start Run Now”开始运行PCR程序。

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16、仪器运行选中的PCR程序,显示运行监视窗口。

A- 运行状态栏,显示运行温度和剩余时间

B- 加热警示标记 C- 阶段指示

D- 步骤温度 E- 步骤时间 F- 步骤指示

C- 状态报告,显示日期、时间和仪器状态

D- 延伸箭头,点箭头可以显示更多的步骤

16、暂停运行:

点“Pause Run”,仪器暂停,出现暂停选项栏

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“Remaining Time”显示暂停剩余时间,“Elapse Time”显示已暂停时间。

如果需要修改暂停时间,点,输入时间值,点“Done”确定;点“Resume Run”,

结束暂停,继续运行PCR程序。

17、终止运行:点“Stop”可以终止整个PCR程序。

18、反应报告:

PCR程序结束后,仪器会自动生成反应报告,显示当次反应的各项指数。该报告可

以保存和打印。

19、PCR反应结束后,打开热盖,取出样品,关闭仪器电源。并开盖放置,使热盖

和加热模块正常降温。

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应用软件使用

一、使用9700模式运行PCR程序

Veriti和9700具有不同的升降温控制模式,但是在Veriti中可以通过模式转换,使仪

器运行9700的升降温模式。对于已在9700上摸索好的PCR程序,可以直接在Veriti

上运行,不用再修改反应条件。

1、在主菜单,点“Tools Manu”,

2、点“Convert a Method”,

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3、选中“9700 Max Mode”,点箭头

输入9700上的PCR反应条件,设定PCR程序,点

4、在保存程序窗口,输入名称,选择文件夹保存程序。

箭头

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5、回到PCR程序列表界面,选择新建的9700模式PCR程序,运行程序。

二、Tm值计算

1、在主菜单,点“Tools Manu”,

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2、点“Calculate Tm”

3、输入盐浓度和引物浓度,在“Primer 1 Sequence”和“Primer 2 Sequence”分别输入

引物的序列,再点“Calculate”,软件计算显示Primer 1和Primer 2的Tm值。

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Gene Company Limited

基因维修管理中心

(010)51664076

(021)64951899-230

(020)85524840-1029

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服务投诉: servicegenecompany.

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本文发布于:2024-10-12 02:52:27,感谢您对本站的认可!

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