DNA提取方法

2024年10月2日发(作者：)

DNA提取方法

材料和试剂：

-需要提取DNA的样品（例如细胞、组织、血液等）

- 细胞裂解缓冲液：含25 mM Tris-HCl（pH 8.0）、50 mM EDTA

（pH 8.0）、1% SDS（溶液A）

-NaCl溶液：5M

-酚-氯仿-异戊醇混合物（溶液B）

-无水乙醇

-75%乙醇

步骤：

1.准备样品：根据需要提取的样品类型和数量，准备适量的细胞或组

织样品。注意保持样品的冷链和洁净。

2.细胞破碎：将样品加入一个离心管中，使用适当的方法破碎细胞膜，

并释放DNA分子。可以使用机械方法（如搅拌器、超声波器等）或化学方

法（如酶解）来破碎细胞。

3.核酸溶解：向破碎的样品中加入适量的细胞裂解缓冲液（溶液A），

彻底混合。细胞裂解缓冲液中的SDS可以降解蛋白质并保护DNA不被降解。

4.清除蛋白质：向上述混合物中加入相同体积的酚-氯仿-异戊醇混合

物（溶液B），轻轻颠倒混合，促使DNA和蛋白质分离。这个混合物可以

通过离心来分离为两个相。

5.分离DNA：将混合物离心约10分钟，离心后可以看到分离为上部

红色相（含蛋白质）、中间白色相（含DNA）和下部无色相（含细胞碎片

和胆固醇）。

6.收集DNA：使用移液器或管道将中间白色相（含DNA）转移至一个

新的离心管中。同时尽量避免带入上下两部分的液体。

7.沉淀DNA：加入等体积的无水乙醇，轻轻颠倒混合，使DNA沉淀出

来。也可以在室温下静置一段时间，帮助DNA沉淀。

8.洗涤DNA：使用75%乙醇洗涤沉淀的DNA，将其离心5-10分钟，去

除乙醇。

9.干燥DNA：使用离心机将离心管倾斜，将剩余的乙醇去除，然后将

离心管倒置，待DNA干燥。

10.溶解DNA：使用适量的纯净水或缓冲液溶解DNA，并储存于-20°C

的冰箱中，以避免DNA的降解。

DNA提取方法的关键是将DNA从其他细胞组分中分离出来，同时保护

其完整性和纯度。酚-氯仿法是一种常见的DNA提取方法，该方法简单、

快速，适用于各种样品类型。提取的DNA可以用于多种实验操作，进一步

研究DNA的结构和功能。