DNA提取过程中各种试剂的作用及原理

2024年10月2日发(作者：)

DNA提取过程中各种试剂的作用及原理

1. 细胞裂解缓冲液（Cell Lysis Buffer）：

作用：细胞裂解缓冲液用于破坏细胞膜和细胞核膜，并释放细胞内的

DNA分子。

原理：细胞裂解缓冲液主要含有非离子性洗涤剂（如Triton X-100

和Tween-20）和盐溶液（如NaCl）。洗涤剂可以溶解和破坏细胞膜，并

释放内部的细胞器和DNA。高盐浓度可破坏细胞核膜，进一步释放核内的

DNA分子。

2. RNase A缓冲液（RNase A Buffer）：

作用：RNase A缓冲液用于降解细胞内的RNA分子，以避免在DNA提

取过程中的RNA污染。

原理：RNase A是一种内切核糖核酸酶，可以特异性地水解单链的

RNA。在DNA提取中，RNase A会降解细胞裂解液中的RNA分子，使其无

法干扰后续DNA的纯化步骤。

3. 蛋白酶K缓冲液（Proteinase K Buffer）：

作用：蛋白酶K缓冲液用于分解和去除DNA周围的蛋白质。

原理：蛋白酶K是一种特异性的蛋白酶，可以水解蛋白质。在DNA提

取中，蛋白酶K会分解细胞裂解液中的蛋白质，包括DNA结合蛋白和酶，

以便纯化DNA。

4. 盐溶液（Salt Solution）：

作用：盐溶液用于沉淀DNA分子，将其从细胞裂解液中分离出来。

原理：DNA可以在高盐浓度下形成沉淀，并从溶液中沉淀出来。通过

加入盐溶液，DNA分子会和盐结合形成可见的凝胶状物质（DNA凝胶）。

5. 酒精沉淀缓冲液（Ethanol Precipitation Buffer）：

作用：酒精沉淀缓冲液用于使DNA形成可见的物质，并沉淀下来。

原理：通过将酒精加入DNA溶液中，可以改变溶液的物理性质，使

DNA凝析成不可溶的颗粒，从而方便后续的离心沉淀。

6. 纯化缓冲液（Purification Buffer）：

作用：纯化缓冲液用于洗涤和纯化沉淀下来的DNA样品。

原理：纯化缓冲液中含有适当的离子浓度和pH值，可以提供适当的

条件，以去除影响DNA纯化的杂质。此外，纯化缓冲液中还添加了乙酰胺，

在DNA表面形成盐桥和氢键，从而将DNA固定在硅胶或磁珠等固相材料上。

7. 洗涤缓冲液（Wash Buffer）：

作用：洗涤缓冲液用于去除纯化缓冲液中残留的杂质，以达到纯化

DNA的目的。

原理：洗涤缓冲液中含有适当的离子浓度和洗涤剂浓度，在一定的温

度和离心条件下，可以有效地去除纯化缓冲液中的杂质。洗涤缓冲液中的

洗涤剂可以与杂质结合并溶解，从而将其洗脱。

8. 精制水（Ultrapure Water）：

作用：精制水用于稀释试剂，并在DNA提取的各个步骤中用于准备各

种缓冲液和反应溶液。

原理：精制水经过多级离子交换和反渗透处理，去除了其中的离子、

微生物和有机溶质等杂质，以获得高纯度的溶液。