专业资料 DNA提取原理及步骤简述

2024年10月2日发(作者：)

DNA

提取原理及步骤简述

DNA

提取的步骤主要有裂解、结合、洗涤和洗脱。以下是

各步骤的作用原理：

1 .

裂解：这一步是必须的，因为

DNA

通常从细胞或其他生物

物质中被释放出来。细胞裂解可以通过机械作用、化学作

用、酶作用等方法实现。其中，酶作用主要是通过加入溶

菌酶或蛋白酶使细胞破裂，核酸释放。蛋白酶还能降解与

核酸结合的蛋白质，促进核酸的分离。

2 .

结合：磁珠表面带负电荷，磁珠

buffer

是高盐环境有带

正电荷的盐离子，样本被

buffer

影响，磷酸基团带负电荷。

3 .

洗涤：核酸的高电荷磷酸骨架使其比蛋白质、多糖、脂肪

等其他生物大分子物质更具亲水性，根据它们理化性质的

差异，用选择性沉淀、层析、密度梯度离心等方法

可将核酸分离、纯化。用无水乙醇沉淀

DNA,

这是实验中最

常用的沉淀

DNA

的方法。乙醇的优点是可以任意比和水相混

溶，乙醇与核酸不会起任何化学反应，对

DNA

很安全，因此

是理性的沉淀剂。当加入乙醇时，乙醇会夺去

DNA

周围的水

分子，使

DNA

失水而易于聚合。

4 .

洗脱：加水或者

EB

破坏高盐环境，形成低盐环境，使

DNA

从磁珠上脱落。

请注意，以上步骤的作用原理可能因具体实验条件和设

备而有所不同。在进行实验时，请根据具体情况调整步骤和

参数。