CTAB法溶液配制

2024年10月2日发(作者：)

CTAB法提取DNA法试剂配制方法

1、1M Tris-HCl 1L配制量

配制方法 称量121.1g Tris 置于1L烧杯中。

加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。

按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值 浓盐酸

7.4 70ml

7.6 60ml

8.0 42ml

将溶液定容到1L。

高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却后加调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异

很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2、10×TE Buffer 1L配制量

配制方法 量取下列溶液，置于1L 烧杯中

1M Tris-HCl Buffer (pH= ) 100ml

500mM EDTA (pH 8.0) 20ml

向烧杯中加入约800ml的去离子水，均匀混合。

将溶液定容到1L后，高温高压灭菌。

室温保存。

3、3M 醋酸钠 100ml配制量

配制方法 称量40.8g NaOAc.H2O 置于烧杯中，加入约40ml的去离子水搅拌溶解

加入冰醋酸调节pH到5.2。

加去离子水将溶液定容到100ml。

高温高压灭菌后，室温保存。

4、苯酚/氯仿/异戊醇

说明：从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯酚/氯仿/异戊醇（25：24：1）。氯仿可使

蛋白质变性并有助于液相与有机相的分离，而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。

配制方法：将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇（24：1）混合均匀后，移入

棕色玻璃瓶中4℃保存。

5、5M NaCl 配制量 1L

配制方法 称取292.2gNaCl置于1L 烧杯中，加入约800 ml的去离子水后搅拌溶解

加去离子水将溶液定容到1L 后，适量分成小份

高温高压灭菌后，4℃保存。

6、0.5M EDTA 配制量 1L

配制方法 称取186.1g Na2EDTA.2H2O，置于1L 烧杯中。

加入约800mL的去离子水，充分搅拌。

用NaOH调节pH值至8.0（约20g NaOH）（注意：pH值至8.0时EDTA才

能完全溶解）

加去离子水将溶液定容至1L。

适量分成小份后，高温高压灭菌。

室温保存。