固相萃取-高效液相色谱检测牛肉中四环素类抗生素残留

2024年11月13日发(作者：)

第３２卷总第８１期　

２　０１　１年３月　

西北民族大学学报（自然科学版）　

Ｖｏ１．３２，Ｎｏ．１　

Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＮｏｒｔｈｗｅｓｔＵａｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｆｏｒＮａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ（Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ）　

Ｍａｒｃｈ，２Ｏｌ１　

固相萃取一高效液相色谱　

检测牛肉中四环素类抗生素残留　

陈士恩，程燕平，阿依木古丽，霍生东，申晓蓉，刘丽霞　

（西北民族大学生命科学与工程学院，甘肃兰州７３００３０）　

［摘要】利用Ｗａｔｅｒｓ２６９５高效液相色谱仪对牛肉中四环素类抗生素残留进行测定．样品经５％高氯酸溶液提取、　

Ｃ】８固相苹取柱净化、旋转浓缩、０．２２／ａｎ微孔滤膜过滤，反相色谱分离，紫外检测．色谱柱为ＷａｔｅｒｓＮｏｖａ—ｐａｒｋ　Ｃｉ８柱（４　ｍ，３．９　

ｍ嘣．ｄ．Ｘ１５０　ｍｍ），以磷酸二氢钠溶液．乙腈．甲醇（体积比为７０：２０：１０）为流动相，流速为０．８　ｎ讧／ｒａｉｎ，紫外检测器检测波长为　

３６５　ｉｒｍ，每次进样１０止，．结果是土霉素、四环素、金霉素的检出限分别为０．０３６　５￣／ｍＬ，Ｏ．０４３　０　ｒｎＩ一、０．０５５　８￣ｇ／ｍＬ，线性范　

围为０．１　ｐｇ／ｍＬ－－一１．０　ｆｌｇ／ｍＬ．测定５４份牛肉样品，只有一份牛肉的金霉素残留为１３２　ｋｇ，高于我国农业部规定的　

最高允许残留量标准（１０ｏ　ｇ／ｋｇ）．　

［关键词】牛肉；高效液相色谱；固相革取；四环素类抗生素；紫外检测　

【中图分类号】￥８５１　４　［文献标识码】Ａ　［文章编号】１００９—２１０２【２０１１）Ｄ１—００６２—０６　

０前言　

四环素类药物被广泛用于防治动物感染性疾病，它的毒性主要有二重感染、肝肾及肠胃反应、可在　

人和动物骨骼和牙齿中沉积，形成“四环素牙”…．四环素族抗生素（Ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ　ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，ＴＣｓ）主要包　

括土霉素（Ｏｘｙｔｅｔｒａｅｙｄｉｎｅ，ＯＴＣ）、四环素（Ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ，ＴＣ）和金霉素（Ｃｈｌｏｒｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ，ＣＴＣ）．它是一　

种广谱抗菌素，对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、立克次体、螺旋体乃至原虫类都有很好的抑制作用．　

ＴＣｓ最明显的残留毒性是诱导耐药菌株产生．　

目前，四环素类抗生素残留检测有色谱法、微生物法、ＥＬＩＳＡ、紫外法、荧光法等．色谱法又分为高　

效液相色谱法（珊ＬＣ）、气相色谱法（Ｇｃ）、色谱一质谱联用法（ＬＣ—ＭＳ）、薄层层析法等【２．３Ｊ．本文采用　

固相萃取一高效液相色谱一紫外检测的方法检测牛肉中四环素类抗生素残留．　

１材料与方法　

１．１实验材料　

牛肉样品分别采自兰州市张苏滩、西部、桃海、五泉山、白银路、铁路新村、雁滩、农民巷、南昌路和建　

兰路等１Ｏ处农贸市场和大世界百货、华润万家、华联、国芳百盛、西太华等８处超市．每处随机采集三　

份，每份约５００　ｇ，共５４份肉样．　

甲醇（色谱纯，天津光复精细化工）、乙腈（色谱纯，天津光复精细化工），磷酸二氢钠（分析纯），５％高　

氯酸（分析纯），乙醚（分析纯，天津四友精细化学品有限公司），土霉素、金霉素、四环素（中国药品生物制　

品检定所，纯度分别为９４％、９２％、９３％）．　

［收稿日期】２０１０—１２～１０　

［基金项目］西北民族大学横向课题（早胜肉牛优质高效综合配套技术体系应用研究与产业化）（编号Ｈ２００８—１１）　

［作者简介］陈士恩（１９６４一），男，副教授，硕士生导师，主要从事食品安全研究．　

一

６２—　

１．２试验主要仪器　

美国Ｗａｔｅｒｓ２６９５系列液相色谱仪（配２９９８型紫外检测器、真空抽滤泵、Ｇ１３１３Ａ自动进样器，　

Ｇ１３１１Ａ四元泵、柱温箱及内置Ｅｍｐｏｗｅｒ数据处理软件），ＲＥ２００２旋转蒸发仪（上海羌强仪器有限公　

司），Ｃ　８固相萃取装置（Ｌｉｄａ公司）．　

１．３试剂的配制Ｌ４　Ｊ　

土霉素（ＯＴＣ）：准确称取土霉素０．０１０　０　ｇ，用０．１　ｍｏｌ／Ｌ盐酸溶液溶解后并定容至１００　ｍＬ，标准液　

浓度为０．１　ｍｇ／ｍＬ（先用少量甲醇溶解后再用盐酸溶解）．　

四环素（ＴＣ）：准确称取四环素０．０１０　０　ｇ，用０．０１　ｍＬ／Ｌ盐酸溶液溶解后并定容至１００　ｍＬ，标准液　

浓度为０．１　ｍｇ／ｍＬ．　

金霉素（ＣＴＣ）：准确称取金霉素０．０２０　０　ｇ，用纯净水溶解后并定容至１００　ｍＬ．标准液浓度为０．２　

ｍｇ／ｍＬ，配制后在冰箱中４℃保存，在１周内使用．　

０．０１　ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钠溶液：称取１，５６０　０　ｇ磷酸二氢钠（ＮａＨ２ＰＯ４・２Ｈ２０）溶于蒸馏水，定容到　

１００　ｍＬ，经微孔滤膜（０．２２　ｍ）过滤．　

分别取１　ｍＬ浓度为０．１　ａｒｇ／ｍＥ的土霉素、四环素和浓度为０．２　ｍｇ／ｍＬ的金霉素，用甲醇稀释定容到１Ｏ　

ｍＬ的容量瓶．得到土霉素、四环素、金霉素浓度分别为１０飕／ｍＬ，１０　Ｖｇ／ｍＩ￣２０ｖｇ／ｍＬ的标准使用液．　

流动相：磷酸二氢钠溶液一乙腈一甲醇体积比为７０：２０：１０．　

１．４色谱条件　

①色谱柱：美国Ｗａｔｅｒｓ公司的Ｗａｔｅｒｓ　Ｎｏｖａ～ｐａｒｋ　Ｃｌ８柱（４　ｇｍ，３．９　ｍｍｉ．ｄ．×１５０　ｍｍ）．②流动　

相：以０．０１　ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钠：乙腈：甲醇＝７０：２０：１０（ｐＨ：２．５）为流动相，等度洗脱．③流速：０．８　

ｍＬ／ｒａｉｎ．④检测波长：３６５　ｎｍ．⑤进样量：１０　Ｌ．⑥柱温：３０℃．　

１．５实验方法［　，５，６，　］　

１．５．１冲洗管路　

实验前先开机冲洗管路，使流动相与色谱柱内的固定相充分结合．Ａ相为０．０１　ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钠　

溶液，Ｂ相为乙腈，Ｃ相为甲醇．洗脱液洗脱程序见表１．　

表１梯度洗脱程序　

１．５．２样品处理　

样品的提取：剔除牛肉中的脂肪组织和筋腱，先用剪刀剪碎，再用组织捣碎机制成匀浆．准确称量　

匀浆的肉样５．００　ｇ，置于５０　ｍＬ的具塞锥形瓶中，加入浓度为５％高氯酸溶液２５．０　ｍＬ，用磁力搅拌器　

搅拌５　ｍｉｎ，使样品均匀分散于高氯酸溶液中，再用超声波震荡仪震荡２　ｒａｉｎ，然后匀浆震荡２５　ｍｉｎ．　

样品的净化：吸取上清液，冷却过滤．滤液经Ｃ　固相萃取柱净化．Ｃ　柱首先用５　ｍＬ甲醇和５　ｍＬ　

水平衡，加入样品后流速控制为２　ｍＬ／ｍｉｎ，用８　ｍＬ３０％甲醇水溶液洗涤，弃去流出液，加入３　ｍＬ甲醇　

溶出，流速控制为１．５　ｍＬ／ｍｉｎ，收集洗脱液．　

样品的浓缩：将滤液置于蒸馏烧瓶中，在４５℃下旋转蒸发近干，用甲醇溶解、转移并定容于２　ｍＬ　

的刻度试管中，经０．２２　ｍ的有机微孔滤膜过滤后，准确加入内标后上机测定．　

１．５．３空白试验　

取２５　ｍＬ浓度为５％的高氯酸于具塞锥形瓶中，不加肉样，重复１．５．２的操作步骤，并在１．４色谱　

条件下测定．做峰面积对浓度的标准曲线，并用之修正样品试验．　

Ｉ．５．４标准曲线的绘制　

一

６３—　

为了对样品进行进一步的定量分析，需要制作标准工作曲线．用标准使用液分别配制不同浓度混　

合标准工作溶液，具体操作与工作液中四环素类的浓度详见表２．在１．４色谱条件下测定，做峰面积对　

浓度的标准曲线．　

衰２工作液的配制　

１．５．５结果与计算　

Ｘ＝Ａ×２／ＭＸ１０－３；Ｘ为试样中抗生素的含量，单位为ｔ￣ｇ／ｋｇ；Ａ为进样管中抗生素的浓度，单位　

为／￣ｇ／ｍＬ；Ｍ为称取的试样质量，单位为ｇ．　

２结果　

２．１色谱条件的优化　

２．１．１色谱柱的选择　

四环素类抗生素的分子中含有酚羟基、烯醇和二甲氨基，具有酸碱两性，在弱酸性条件下较为稳定．　

检测四环素类抗生素多用反相色谱柱．实验结果表明Ｃ　的色谱柱因其填料粒径小、比表面积大、柱效　

高、分离效果显著，出峰扩展小、灵敏度高．故直接选用美国Ｗａｔｅｒｓ公司的Ｗａｔｅｒｓ　Ｎｏｖａ—ｐａｒｋ　Ｃｌ８（４　

／ｌｍ，３．９　ｍｍｉ．ｄ．×１５０　ｍｍ）色谱柱进行实验．　

２．１．２检测波长的选择　

土霉素、四环素、金霉素属于四环族类抗生素，具有发色基团，可用紫外光进行检测．对三种化合物　

分别进行２００－－５００　ｎｍ的紫外扫描，结果显示见图１、图２、图３．　

苇喜士　四环紊　

０．６ｔ　

０．５・　

０．４ｔ　

０．３・　

０．２ｔ　

０．１ｔ　

０ｔ　

－

０．１　

－　

２５０・　３００　３５０ｔ　４００。４５０，　５００ｒａ￣　

图１土霉素的紫外一可见光谱图　图２四环素的紫外一可见光谱图　

由图１、图２、图３三个图谱可知土霉素在２６８　ｎｍ、３６５　ｎｍ处有两个吸收峰，四环素在２６０　ｎｍ、３８０　

ｎｍ处有两个吸收峰，金霉素在２２０、２７０、３６５处有三个吸收峰．２２０蚰　处土霉素和四环素没有响应，　

２１０　ｒｉｍ为甲醇、乙腈的截止吸收波长，易产生干扰．所以决定选用３６５　ｎｍ作为紫外检测波长．　

２．１。３流动相配比的选择　

２．１．３．１流动相ｐＨ的选择　

四环素具有微极性，在酸性条件下有助于保留极性和峰型．但色谱Ｃ　柱的填料主要为二氧化硅，　

二氧化硅具有两性，超出一定的ｐＨ值会使其溶解．故一般要求流动相的ｐＨ值要在２～７．５之间．在　

此范围内改变流动相ｐＨ值，发现随着ｐＨ值的减小，四环素的分离度及灵敏度有所上升，因此决定选用　

－－——

６４・———　

ｐＨ为２．５的流动相．在磷酸二氢钠浓度为０．０１　ｍｏｌ（可用３０％硝酸调节ｐＨ值），流动相可达到此值，　

因此参照ＧＢ／Ｔ５００９．１１６—２００３，选择０．０１　ｍｏｌ浓度的磷酸二氢钠溶液．　

２．１．３．２有机相在流动相中比例的选择正向色谱分离与反相分配色谱分离原理不同，反向色谱是样品　

的非极性部分起保留作用．有机相的非极性大于水溶液，相对容易将样品从色谱柱上洗脱，减小样品的　

保留时间．经参考国标ＧＢ／Ｔ５００９．１１６—２００３和文献［８，９，１０］后，决定选择０．０１　ｔｏｏｌ的磷酸二氢钠溶液和有机　

相为流动相，配比为７０：３０．考虑到乙腈的非极性大于甲醇，故有机相中的配比为乙腈：甲醇＝２０：１０．　

２．１．３．３流速的选择　

因为三种抗生素中土霉素和四环素的被分离时间接近，相对来说对其分离更难．故以土霉素和四　

环素的峰高分离度为研究对象，测定在流动相流速范围为０．２～１．２　ｍＬ／ｍｉｎ时的峰高分离度变化．以　

流速为横坐标、分离度为纵坐标．测定结果见图４．　

金霉紊　

＾　

１　２　

一一—＼　

１　　．

０　８　

Ｏ　６　／　

度　

ｌ：．：　／　

２００　２５０　３００　３５０　４００　４５０　５００ｎｍ　

图　金霉累紫外一可见光谱图　图４流速对分离度的影响　

从图可看出流动相流速在．～．　时，土霉素与四环素的分离度较好，分离效果好．　

但流速为．　时保留时间过短，出峰快，不利于分析．因此选．　为流动相的流速．　

２．２最佳线性范围的选择　

由表可知混合标准工作液中土霉素、四环素的浓度是对应的金霉素的两倍，这是考虑到金霉素的　

响应度较弱的缘故．用五种不同浓度的混合工作液在．色谱条件下测定，经空白试验校正后做峰面　

积对浓度的标准曲线，得到三种抗生素的回归方程如表３．　

表　四环素类抗生素的线形方程及相关系数（　）　

从表可以看出，土霉素、四环素、金霉素工作曲线的相关系数在．　以上，说明线性较好．故　

土霉素、四环素线性范围分别为．１、．２、．４、．、．　ｍＬ；金霉素线性范围为。２、．４、．、１．、　

●　●　

．　

方法的检出限　

取　标准使用液用甲醇溶液稀释定容到　，即土霉素、四环素、金霉素的浓度分别为．　

、．　、．　

的混合工作液，在１．４色谱条件下用　软件分析，按基线噪声的　

倍计算方法的检出限得出四环素类的检出限分别为．　、．　、．　．　

．　

加样回收率试验　

称取５．　不含有上述种四环素类抗生素的牛肉样品，添加不同剂量的　种四环素类抗生素参　

考标准溶液，按“．．２”的操作对样品进行前处理，在“．４”的仪器条件下，每个标准样品的每一剂量平　

行测定５次，采用内标法对３种目标物进行定量，实验结果如表４所示．　

一

６５～　

衰４加样回收率试验ｌ　７／＝５）　

２．４．１样品测定结果　

对５４份牛肉样品进行检测，只有采自农贸市场的３份肉样分别检出四环素和土霉素，其中１份肉　

样金霉素含量达到１３２　ｖｇｌｋｇ，超过了国家农业部发布的《动物性食品中兽药最高残留限量＞规定的１００　

￣ｇ／ｋｇ限量标准　‘　；２份肉样分别测定出有土霉素（５６　／ｋｇ）和金霉素（７８　ｇ／ｋｇ）残留，但不超过农业　

部的有关规定．具体结果见表５．　

表５样品四环紊类抗生素残留检测结果　

（ＮＤ：ｎｏｔ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ）　

３分析与讨论　

本文选用固相萃取一反相高效液相色谱一紫外检测法测定牛肉组织中土霉素、四环素、金霉素等四　

环素类抗生素残留，主要实验条件为Ｗａｔｅｒｓ２６９５液相色谱仪，附２９９８型紫外检测仪，色谱柱为Ｗａｔｅｒｓ　

Ｎｏｖａ—ｐａｒｋ　ｃｌ８柱（４　，３．９　ｍｉｎｉ．ｄ．×１５０　ｍｍ）．色谱条件优化为：进样量１０　Ｌ，检测波长为３６５　ｒｉｍ，　

柱温３０℃，流速０．８　ｍＬ／ｒａｉｎ，柱压在８００Ｎ９００　ｐｓｉ范围波动．流动相为磷酸二氢钠：乙腈：甲醇＝７０：　

２０：１０．线性范围为０．１￣ｇ／ｍＬ　１．０￣ｇ／ｍＬ．出峰顺序依次为土霉素、四环素和金霉素，实验条件良　

好、峰形较好，结果见图５．　

本实验测定５４份牛肉样品，结果显示兰州市售牛肉中四环素类抗生素残留阳性率不高（１／５４）．只　

有１份牛肉的金霉素残留为１３２　ｋｇ，高于我国农业部规定的最高允许残留量标准（１００　ｇ／ｋｇ）．这　

说明兰州市售牛肉四环霞娄抗牛索残留低，肉食品足比较安伞的．　

图５三种四环素类抗生素标准色谱图【３６５　ｎｍ）　

一

６６一　

参考文献：　

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ｌｆｕｏｒｏｑｕｉｎｏｌｏｎｅｓ　ｉｎ　ｅａｄｉｓｈ　ｍｕｓｃｌｅ　ｕｓｉｎｇ　ｈｉｇｈ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｗｉｔｈ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ［Ｊ］．　

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Ｓｏｌｉｄ。——Ｐｈａｓｅ　Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ。——ｈｉｇｈ　Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　Ｌｉｑｕｉｄ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ　

Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　Ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ　Ｃｌａｓｓ　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ　Ｒｅｓｉｄｕｅｓ　ｉｎ　Ｂｅｅｆ　

ＣＨＥＮ　Ｓｈｉ—ｅｎ，ＣＨＥＮＧ　Ｙａｎ—ｐｉｎｇ，ＡＹｉｍｕｇｕｌｉ，　

ＨＵＯ　Ｓｈｅｎｇ—ｄｏｎｇ，ＳＨＥＮ　Ｘｉａｏｒ—ｏｎｇ，ＬＩＵ　Ｌｉ—ｘｉａ　

（Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ　Ｍｉｎｏｒｉｔｉｓｅ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｌａｎｚｈｏｕ　７３００３０，Ｃｈｉｎａ）　

［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ　ｃｌａｓｓ　ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ　ｒｅｓｉｄｕｅ　ｏｆ　ｍｅｔｈｏｄ　ｔｏ　ｕｓｅ　ｓｏｌｉｄ—　

ｐｈａｓｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ—ＨＰＬＣ　ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｂｅｅｆ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｉｄｕａｌ　ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ　ｃｌａｓｓ　ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ　ｗｅｒｅ　

ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｉｎ　ｂｅｅｆ　ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　Ｗａｔｅｒｓ　２６９５　ｈｉｇｈ—ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ．Ｔｈｅ　ｓａｍｐｌｅ　ｂｙ　５％　

ｐｅｒｃｈｌｏｒｉｃ　ａｃｉｄ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，Ｃ１８　ｓｏｌｉｄ　ｐｈａｓｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｃｏｌｕｍｎ　ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ，ｒｏｔａｔｉｎｇ　ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ，０．　

２２／￣ｍ　ｍｉｃｒｏｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ　ｍｅｍｂｒａｎｅ　ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ，ｒｅｖｅｒｓｅｄ—ｐｈａｓｅ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ，ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ　

ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ．ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ　ｃｏｌｕｍｎ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　Ｗａｔｅｒｓ　Ｎｏｖａ—ｐａｒｋ　Ｃ１８　ｃｏｌｕｍｎ（４　ｍ，３．９　ｍｍｉ．ｄ．×１５０　

ｍｍ），ｗｉｔｈ　ｓｏｄｉｕｍ　ｄｉｈｙｄｒｏｇｅｎ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ—ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ—ｍｅｔｈａｎｏｌ（ｖｏｌｕｍｅ　ｒａｔｉｏ　７０：２０：１０）ａｓ　

ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ，ｖｅｌｏｃｉｔｙ　ｆｏｒ　０．８　ｍＬ／ｍｉｎ，ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｆｏｒ　３６５　ｎｍ，ｅａｃｈ　ｉｎｃｏｍｉｎｇ　ｓａｍｐｌｅ　１０　Ｌ．　

Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｏｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ，ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ，ａｕｒｅｏｍｙｃｉｎ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｌｉｍｉｔ　ｏｆ　０．０３６５　

ｇｇ／ｍＬ，０．０４３０　ｇ／ｍＬ，０．０５５８／ｌｇ／ｍＬ，ｌｉｎｅａｒ　ｒａｎｇｅ　ｆｏｒ　０．１／ｌｇ／ｍＬ　１．０　ｇｇ／ｍＬ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　５４　

ａｓｍｐｌｅｓ　ｂｅｅｆ，ｏｎｌｙ　１　ｓａｍｐｌｅｓ　ｂｅｅｆ　ａｕｒｅｏｍｙｃｉｎ　ｒｅｓｉｄｕｅ　ｆｏｒ　１３２　ｂｔｇ／ｋｇ，ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　Ｃｈｉｎａ　ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　

ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ　ｐｒｅｓｃｒｉｂｅｄ　ｍａｘｉｍｕｍ　ｐｅｒｍｉｓｓｉｂｌｅ　ｒｅｓｉｄｕｅｓ　ｓｔａｎｄａｒｄ（１００　ｂｔｇ／ｋｇ）．Ｉｎ　ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ，ｔｈｅ　ｓａｌｅ　ｂｅｅｆ　ｉｎ　

ｌｎａｚｈｏｕ　ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ　ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ　ｒｅｓｉｄｕｅｓ　ｒａｔｅ　ｉｓ　ｎｏｔ　ｈｉｇｈ（１／５４）．Ｔｈｉｓ　ａｒｔｉｃｌｅ　ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｓ　ｓｏｌｉｄ—ｐｈａｓｅ　

ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ—ＨＰＬＣ—ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ　ａｓｓａｙ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｂｅｅｆ　ｔｉｓｓｕｅｓ，ｓｕｃｈ　ａｓ　ｏｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ，ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ，　

ａｕｒｅｏｍｙｃｉｎ　ｅｔｃ　ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ　ｃｌａｓｓ　ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ　ｒｅｓｉｄｕｅｓ　ａｒｅ　ａｃｃｕｒａｔｅ　ａｎｄ　ｈｉｇｈ　ａｃｃｕｒａｃｙ．　

［Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ】Ｂｅｅｆ；ＨＰＬＣ；Ｓｏｌｉｄ—ｐｈａｓｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；Ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ　ｃｌａｓｓ　ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ；Ｕｌｒｔａｖｉｏｌｅｔ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　

～

６７—